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EGFR V769_D770insASV/BaF3

CBP73176

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I. Background

      EGFR(Epidermal Growth Factor Receptor)是上皮生长因子(EGF)细胞增殖和信号 传导的受体,EGFR 是一种糖蛋白,属于酪氨酸激酶型受体,位于细胞膜表面,靠与配体 结合来激活。EGFR 与肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭、转移及细胞凋亡的抑制有 关。EGFR 基因突变是预测 NSCLC 患者使用 EGFR-TKIs 疗效的重要靶标。

      EGFR 酪氨酸激酶区域的突变主要发生在 18-21 外显子,其中 19 号和 21 号外显子突 变覆盖突变的 90%。EGFR 突变主要包括 4 种类型:外显子 19 缺失突变、外显子 21 点突 变、外显子 18 点突变和外显子 20 插入突变。最常见的 EGFR 突变为外显子 19 缺失突变 和外显子 21 点突变,二者均会导致酪氨酸激酶结构域活化。EGFR 基因突变可以分为两大 类,一个是药物敏感突变,也就是突变后可以使用某种靶向药物(如 19 缺失,L858R 突 变),另一个是耐药突变,即突变后对某种靶向药物耐药(如 T790M 突变)。

 
II. Description

      BaF3(小鼠原 B 细胞)的生长和增殖需要 IL-3 的维持。通过引入各种表达激酶的基因, 能作为 BaF3 的驱动基因,让 BaF3 不再依赖 IL-3 而增殖,进而激酶基因成为 BaF3 增殖依 赖的驱动基因,用于评估小分子药物对激酶的靶向抑制作用,原理及流程见所图所示。
 



Figure 1. 
EGFR[V769_D770insASV] BaF3 细胞的构建原理图

 
III. Introduction
Cell Line Name: EGFR V769_D770insASV/BaF3
Host Cell: Ba/F3
Stability: 16 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Application: Useful for the study of enzyme kinetics, screening inhibitors, and selectivity profiling.
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Complete Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS
Mycoplasma Status: Negative
 
IV. Representative Data

1.WB of EGFR expression



Figure 2. WB of EGFR V769_D770insASV/BaF3
 

2. Sanger Sequencing of EGFR V769_D770insASV



Figure 3. Sanger of  EGFR V769_D770insASV/BaF3
 

3. Anti-proliferation assay

Figure 4 . CTG Proliferation Assay of EGFR [V769_D770insASV] BaF3(C1).


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